如何选择ELISA试剂盒
1. 检查待测样本的蛋白浓度
在选择ELISA试剂盒时,首先需要通过NCBI文献、UniProt和PAX-DAB等数据库获取待测样本的蛋白表达量参考值。这将帮助您比较试剂盒提供的样本值与已报道的值是否一致。
2. 试剂盒的适用种属与样本类型
通常,试剂盒的适用种属与样本类型有严格规定,除非特别说明。常见的待测样本包括血清、血浆(不同抗凝剂)、细胞上清和细胞裂解液,且不同样本的稀释液不能混用。
3. 检测范围
检测范围即为标准曲线范围,非常重要的是确认待测样本的浓度是否位于该范围内。对于浓度较高的样本,建议通过预实验找到最佳稀释倍数,然后再进行大规模测定。
4. 稀释线性及回收率
稀释线性通常指样本的稀释程度。建议进行样本梯度稀释以观察稀释梯度浓度的线性关系。此外,加标稀释线性也是重要的评估指标,需确认加入标准品的浓度测定是否准确。一般来说,线性和回收率的范围在80%-120%之间较为理想。
5. 其他性能指标
尊龙凯时的ELISA试剂盒在灵敏度方面表现优异,可以检测到极低浓度的样本。对于含量极低的待检指标,建议选择高灵敏度的试剂盒。此外,板间与板内的变异系数(CV%)应小于10%以保证实验的均匀性。
6. 试剂盒的有效期
试剂盒的有效期通常为半年到一年,样本准备期间要注意这一点,以确保实验结果的可靠性。
7. 特异性
试剂盒的特异性主要与其关键组件及抗体相关。如果使用多克隆抗体,建议配合单克隆抗体使用,以增强检测的特异性。
8. 重复性
科学实验强调重复性,一般情况下,ELISA试剂盒的板内和板间变异系数应控制在15%以内,以确保数据的可靠性。
9. 简便性
在保证数据高质量的同时,操作简便、实验时间短的试剂盒更容易受到欢迎。因此,简便性也是选购时的重要考虑因素。